Startpagina / Samenvattingen / Beeldvormende technieken / biotine-labeling-hoeveelheid

Labelingstechnieken

3 belangrijke vragen over Labelingstechnieken

Wat zijn de verschillende labelingstechnieken bij RNA in situ hybridisatie als bij immunocytochemie?

1) radioactieve labeling
2) fluorescente labeling
3) digoxigenin
4) biotine
5) enzym

Wat is het verschil in radioactieve labeling, fluorescente labeling en enzymatische staining?

radioactieve labeling is heel goed om iets mee te kwantificeren, aangezien de hoeveelheid straling een lineaire verhouding heeft met de hoeveelheid radioactief materiaal.Dit is echter veel vrijwel niet geschikt voor beeldvorming. Fluorescente labeling verbleekt door licht. Hoe langer je er naar kijkt, hoe minder er te zien is. Dat is dus niet geschikt voor kwantificatie. Maar de beeldvorm is hierbij wel heel goed. Enzymatische kleuringen zitten hier vaak tussenin. Redelijke anatomische informatie maar door chemische versterkingstappen in het protocol is er vaak maar een beperkt lineair verband met de hoeveelheid aan te tonen stof.

Waarvoor wordt biotine gebruikt en wat is het?

Het wordt wel gebruikt voor chemische amplificatie. Dit gebeurt doordat aan het tweede antilichaam biotine wordt vastgemaakt. Dit wordt samen in een oplossing met avidine gegooid en met biotine dat vastzit aan mierikswortel. Omdat biotine aan avidine gaat klonteren, gaat het hele geheel zich dus samenklonteren. Zo komen er dus veel tweede antilichamen op 1 plek. mierikswortel kan stoffen oxideren.