Startpagina / Samenvattingen / Analytische chemie / migreren-capillair-lading

Elektrochemische methodes - Elekroforetische technieken

5 belangrijke vragen over Elektrochemische methodes - Elekroforetische technieken

Waarom is de vaste drager belangrijk bij deze methode?

- gaat beweging van de componenten door diffusie tegen
- zit meestal een koelelement in om de vorming van warmte tegen te gaan
- maakt behandelen en verplaatsen mogelijk
- ondersteunt de scheiding doordat het een zeef vormt die de grote delen moeilijker laat migreren dan kleinere deeltjes

Welke dragers worden gebruikt bij de elektroforese?

agarose, nadeel: bevat geladen groepen
polyacrylamide, nadeel: is giftig, poriëngrootte is veel kleiner dan bij agarose

Hoe wordt het resultaat zichtbaar gemaakt?

Door een kleurstof zoals Coomassieblauw te gebruiken.
Eerst wordt dan alles blauw, en later ontkleurt de gel

Hoe worden de eiwitten gescheiden bij IEF?

Op basis van hun iso-elektrisch punt. Er wordt eerst een pH-gradiënt aangelegd door amfolieten. Bij het aanleggen van de stroom zullen de amfolieten eerste migreren naar de plaats waar hun lading nul is. Daarna migreren de eiwitmoleculen. De lading verandert hierbij telkens. Ze stoppen met migreren wanneer hun lading nul is.

Hoe werkt capillaire elektroforese (CE)?

Een hoge spanning wordt aangelegd over een met bufferoplossing gevuld capillair. De analyten worden in deze capillair aangebracht en met één van de verschillende elektroforetische technieken gescheiden.
De banden worden niet gedetecteerd door kleuring.