Startpagina / Samenvattingen / Bewustzijnsfilosofie / methode-sanger-dna

Biotechonology - DNA sequencing methods

4 belangrijke vragen over Biotechonology - DNA sequencing methods

Wat is de Sanger methode? Deze wordt ook wel de 'chain-termination DNA sequencing methode' genoemd.

De Sanger-methode omvat de synthese van een nieuwe DNA-streng met behulp van het DNA waarvan de sequentie moet worden bepaald als een template/sjabloon.

Een DNA-sequentiemethode die dideoxynucleotiden gebruikt om de DNA-replicatie op willekeurige plaatsen te beëindigen.

Wat zijn de beginproducten die nodig zijn voor de Sanger sequentie methode?

Template DNA (3' -> 5'), DNA polymerase, primer (5' -> 3') en DeoxyNTPs (A,C,G,T).

Hoe eindigt een Sanger sequentie methode?

Als er in een bepaald buisje bijv de DeoxyNTP T (thymine) in zit en deze deoxyNTP wordt ingebouwd, dan eindigt de replicatie. Deze worden daarna voor alle 4 de typen nucleotiden uitgezet op een gelelectroforese plaat. De kleinste moleculen komen het verst op de plaat. Zie de foto bij de vraag.

Wat is het verschil tussen de nieuw ontworpen methode: nest-generation sequencing (NGS) en de Sanger methode?

In plaats van lange genomische strengen in oplossing, gebruikt NGS korte, afgeschoven stukjes DNA-sjablonen met oligonucleotiden, adapters genoemd, die aan elk uiteinde zijn bevestigd.

Bij NGS geen plasmide Library nodig! Je kunt direct werken op het DNA dat je hebt geïsoleerd. Dit gaat dus sneller dan bij Sanger methode.