Lees hier de samenvatting en de meest belangrijke oefenvragen van Toegepast biochemie

• 1 Thema 1 DNA

• 1.1 Gen regulatie en DNA toepassingen

  Dit is een preview. Er zijn 16 andere flashcards beschikbaar voor hoofdstuk 1.1
  Laat hier meer flashcards zien

• Wat zijn restrictie endonucleases en waarvoor worden ze gebruikt? 

  Restrictie endunucleases zijn enzymen die instaat zijn om DNA op bepaalde plaatsen te knippen. Om andere genen in een DNA streng in te brengen.

• Wat is de oorspronkelijke functie van restrictie endonucleases?

  Er wordt geknipt zodat het een afweer heeft tegen fagen, zodat het niet wordt vermenigvuldigd en de rest van de cellen worden besmet.

• Wat wordt bedoeld met een tweezijdige rotatie symmetrie (palindroom)?

  Dat wanneer er geknipt wordt, dat de tegenstelde DNA keten gespiegeld wordt geknipt ten opzichte van de andere DNA keten. 

• Wat zijn sticky(staggered) en wat zijn blunt ends?

  Uiteinde van twee geknipte fragmenten met een palindrome sequentie.

• Wat zijn restrictiemaps en waarvoor worden ze gebruikt?

  Weergeven de fysieke locatie van restrictiesites. Je kunt hiermee zien op welke plaatsen de DNA streng is geknipt. 

• Wat wordt bedoeld met een DNA fingerprinting?

  Het uitvoeren van elektroforese om zo DNA fragmenten te kunnen scheiden en een uniek patroon te verkrijgen voor verschillende cellen. 

• Hoe werkt agarose gel electroforese? Op basis waarvan worden DNA fragmenten gescheiden? 

  DNA fragmenten worden gescheiden op basis van lading waarbij de DNA fragmenten naar de kathode bewegen vanwege hun negatieve lading. De kleinste moleculen bewegen als eerst omhoog. 

• Hoe cloneer je een vreemd gen in een plasmide en welke enzymen heb je daar voor nodig?

  Doormiddel van de PCR techniek, waarbij eerst denaturatie plaats vind en vervolgens waterstofbruggen worden verbroken dit gebeurd door een polymerase enzym. Vervolgens wordt er een hybridisatie primer aangeplakt. Daarna vindt Elongatie plaats, bouwen van nucleotiden aan primer. (primer isoleert klein stukje, dat word vermenigvuldigd).

• Welke belangrijke onderdelen kun je onderscheiden in een expressie plasmide en waar cloneer je je gen in het plasmide?

  De resistente genen in de plasmide en de originele replicatie plaats. Je gen cloneer je in de vector tussen de lac operon en het stopcodon.

• Uit welke stappen bestaat PCR en waarvoor wordt het gebruikt?

  Denaturatie, hybridisatie en elongenatie voor het vermenigvuldigen van een bepaald gen.
  
  https://www.youtube.com/watch?v=NODrmBHHni8&list=PL5Tt51-5WsX3LtNQ9J7evpl1zQ-lk7-Ba&index=1