Lees hier de samenvatting en de meest belangrijke oefenvragen van Wat vragen uit oude tentamens

• 1 Wat vragen uit oude tentamens

  Dit is een preview. Er zijn 19 andere flashcards beschikbaar voor hoofdstuk 1
  Laat hier meer flashcards zien

• Wat wordt er bedoeld met formulering van een biopharmaceutisch geneesmiddel? Waarom moeten biopharmaceuticals geformuleerd worden? 

  Pharmaceutical formulation is the process in which different chemical substances, including the active drug, are combined to produce a final medicinal product.
  De meeste eiwitten zijn van nature zeer instabiel. Om deze stabiliteit te verhogen worden er stoffen (buffers, albumin, detergents, etc) aan het preparataat toegevoegd.
  Formulering zorgt ook voor betere oplosbaarheid, en verkomt adsorptie (b.v. aan de injectiespuit) en aggregatie. 

• De ziekenhuisapotheek krijgt Herceptin binnen als gevriesdroogd materiaal. In de bijsluiter staat het volgende:“Swirl vial gently to aid reconstitution. Do not shake”Leg uit waarom je niet mag ‘shaken’ (geef uitleg op het moleculaire niveau).

  Shaken leidt tot luchtbellen en daarmee wordt het totale water-lucht oppervlakte vergroot.  Hydrophobe sites van de eiwitten ‘verzamelen’ zich aan dit oppervlakte, met als gevolg dat de eiwitten gaan aggregeren.

• Je komt als (toekomstig) ziekenhuisapotheker met de volgende situatie in aanraking: Een diabetes patiënt heeft een continu infuus met insuline. Dit wordt gedaan omdat de patiënt langdurig nuchter moet blijven. De patiënt is benauwd en daarom moet hij ook intraveneus theofylline toegediend krijgen. De verpleegkundige vraagt vervolgens aan jou of ze insuline en theofylline via het zelfde infuus mag toedienen?Welke informatie heb je nodig om deze vraag te kunnen beantwoorden.Geef uitleg.

  Antwoord:
  1) Veranderd de pH van de oplossing wanneer er theophyline er aan toe wordt gevoegd.
  En 2). Bindt theophyline aan insuline?
  
  Eiwitten zijn voor hun structuur sterk pH afhankelijk. Dat betekent dat pH de oplosbaarheid en de fysisch en chemische stabiliteit beïnvloeden. Rond de pI verandert bv de oplosbaarheid. Een verkeerde pH kan leiden tot aggregatie en daardoor potentieel tot een immuunrespons. 

• Soms worden er detergents, zoals tween 20, aan een biopharmaceutisch preparaat toegevoegd. Waarom wordt dat gedaan?

  Detergentia schermen hydrophobe aminozuren af in het eiwit. Hierdoor wordt aggregatie voorkomen. 

• De concentratie detergent mag echter niet te hoog zijn. Geef hiervoor twee verklaringen. Leg het antwoord goed uit

  1) Een te hoge concentratie detergents kan het eiwit denatureren.
  2) Een injectie met ‘zeep’ is niet echt lekker voor de patient. 

• De kwaliteit van een pharmaceutisch eiwit is veel moeilijker vast te stellen dan de kwaliteit van een klassiek geneesmiddel. Prof Dr Crommelin heeft in zijn college over de productie en zuivering van farmaceutische eiwitten in dit verband het volgende gezegd:“The quality is in the process”.Wat bedoelde hij met deze uitspraak?

  Je zou verontreinigingen in het eindproduct kunnen meten. De concentratie van veel (potentiele) verontreinigingen zal in de meeste gevallen zeer laag zijn (denk aan virussen) en daardoor zeer moeilijk te meten. Er is daarom gekozen om iedere stap in het productieproces van een biopharmaceutical te valideren (=de kwaliteit te onderzoeken). De aanname is dat wanneer alle afzonderlijke stappen goed zijn, het eindproduct goed zal zijn (gezien de lage concentraties van verontreinigingen, etc, dan dit nooit met 100% zekerheid worden vastgesteld. 

• Om de “shelf-life” van een biopharmaceutical te verlengen wordt het eiwit vaak gevriesdroogd. Geef aan op basis van het vriesdroogproces waarom dat niet altijd gedaan wordt.

  Antwoord: Vriesdrogen is het verwijderen van water door sublimatie bij lage druk en lage temperatuur (tot wel -40˚C). Daarvoor moet het eiwit bevroren worden. Zonder beschermende stoffen zal het waterkristallisatieproces bij het invriezen het eiwit structureel onherstelbaar kunnen beschadigen of er treedt irreversibele denaturatie/aggregatie of precipitatie op. Sommige eiwitten hebben een zo gevoelige structuur (bv enzymen, maar ook antilichamen) dat vriesdrogen zelfs met beschermende stoffen niet mogelijk is.

• Wat is de reden is dat bij het vriesdroogproces lyoprotectants worden toegevoegd.

  Beschermende stoffen bij het vriesdrogen worden lyoprotectants genoemd (suikers als sucrose of mannitol, maar ook albumine). Eiwitten worden omgeven door een beschermende waterlaag bijeengehouden door waterstofbruggen. De lyoprotectants vervangen water als beschermende laag omdat deze niet meekristalliseren en niet sublimeren. Daarnaast verhogen ze de Tg (glas transitie temperatuur), waardoor hogere en dus gunstigere vriesdroogtemperaturen gebruikt kunnen worden.

• Het grootste gedeelte van alle biologicals die op de markt zijn, zijn monoklonale antilichamen.Wat wordt er bedoeld met monoklonaal? Hoe zorg je ervoor dat je antilichaam preparaat ook echt monoklonaal wordt/is? 

   Monoclonal antibodies (mAb or moAb) are monospecific antibodies that are made by identical immune cells that are all clones of a unique parent cell, in contrast to polyclonal antibodies which are made from several different immune cells. Monoclonal antibodies have monovalent affinity, in that they bind to the same epitope.
  
  Om zeker te zijn dat hybridoma cellen in een bepaald preparaat allemaal het zelfde antilichaam maken (dus monoklonaal zijn), wordt ‘limited dilution’ toegepast. Hybridoma cellen worden daarbij verdeeld over wells in een 96 wells-plate in een concentratie < 1 per well. De kloons die hier uit groeien zijn waarschijnlijk monoklonaal. 

• Over de jaren zijn er veel ontwikkelingen geweest in de productie van antilichamen, met als resultaat dat het volledig humane antilichaam tegenwoordig de standaard is (ipv. chimere en gehumaniseerde antilichamen). Een volledig humaan antilichaam bevat geen enkele sequentie die afkomstig is van een muis of ander dier, maar toch worden bij veel patienten, die ‘fully human antibodies’ krijgen toegediend,  ‘HAHA’s’ (Human anti-human antibodies) aangetroffen.Geef hiervoor de meest voor de hand liggende verklaring. Licht je antwoord duidelijk toe.

  De meest voor de hand liggende verklaring is de (verkeerde) formulering. Elk antwoord dat over sequenties gaat is fout want die sequentie is volledig identiek, het probleem zit hem hier in een immuunrespons als gevolg van aggregaatvorming. Dit kan komen door verkeerde formulingen/hulpstoffen of door een verschil in glycosylering waardoor het mAb minder stabiel is. (Deze problemen zijn opgelost in de meer recentere Human mAbs, met name Humira, de allereerste heeft hier relatief veel last van).
  
  Ook ‘verkeerd bewaren’ (te warm, shaken, etc) van de MoAb’s kan leiden tot aggregaten en uiteindelijk tot de vorming van HAHA’s.